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《中國農業大學學報》 2020年09期
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長期繼代培養的轉基因蘋果外源基因遺傳及表達穩定性分析李玉生陳龍程和禾趙艷華吳雅琴李友剛吳永杰

(河北省農林科學院昌黎果樹研究所  河北昌黎066600)  
【摘要】:為研究長期繼代培養的轉基因蘋果組培苗中外源基因的遺傳及表達穩定性,以繼代培養9年的7個轉GFP(綠色熒光蛋白)基因蘋果株系組培苗為試材,分析轉基因株系對Kan(卡那霉素)的抗性、DNA水平、轉錄水平和轉錄后水平GFP基因的遺傳及表達穩定性。結果表明,在7個蘋果轉基因株系組培苗中均可檢測出GFP特異基因片段,并且均可在含有50mg/L卡那霉素的培養基上正常生長;絕對定量qRT-PCR檢測發現,各轉化株系GFP基因拷貝數并不相同;利用相對定量qRT-PCR法檢測發現7個株系中GFP基因mRNA表達量有明顯差異,同時熒光顯微鏡下觀察各轉化株系葉片,綠色熒光強度有明顯差異,利用SPSS軟件對7個轉基因株系中GFP基因拷貝數與GFP mRNA表達量相關性分析結果呈無顯著相關性。以上結果表明,外源基因可以在長期繼代培養的轉基因蘋果組培苗中保持其遺傳穩定性,但不同轉化株系中外源基因的表達量有顯著差異,其表達量與拷貝數無顯著相關,可能與外源基因在植物基因組中的插入位點有關。

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