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《中華肺部疾病雜志(電子版)》 2020年04期
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靶向核殼蛋白基因的siRNA對流感病毒的預防和治療作用

史亮  尹申慧  任浩  高榮  馬壯  孫文武  曹建平  
【摘要】:目的 探討靶向核殼蛋白(nucleoprotein,NP)的siRNA對甲型流感病毒(influenza virus A,IAV)的預防及治療作用。方法 在對IAV測序的基礎上設計對NP保守區特異的小干擾RNA (small interfering RNA,siRNA),并觀察在犬腎細胞(Madin-Darby canine kidney,MDCK)中先轉染了siRNA然后以IAV感染,或先以IAV感染,然后轉染siRNA時MDCK細胞中IAV載量的變化。結果 1.轉染了siRNA的MDCK細胞再進行IAV感染,不同劑量siRNA組均較轉染劑對照組IVA病毒載量顯著降低(20 pmol siRNA組,P0.05; 40 pmol siRNA組,P0.05; 80 pmol siRNA組,P0.01); 2.當細胞在轉染siRNA之前感染IAV,siRNA組的病毒載量顯著低于對照組(P 0. 01),也低于轉染試劑組(P 0. 05);3.免疫細胞化學結果顯示:無論MDCK細胞預先轉染siRNA還是感染了IVA后再進行siRNA轉染,siRNA組的NP蛋白表達均明顯低于對照組(P0.01)。結論 靶向NP的siRNA通過干擾IVA的NP蛋白合成,從而對IVA的生長產生抑制作用;無論MDCK細胞感染IVA前后應用靶向NP的siRNA轉染均可以降低IVA的產生,說明靶向NP的siRNA對于IVA感染具有預防及治療作用。

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